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NEWS尊龙凯时:分光光度计与荧光计的DNA/RNA定量选择指南
来源:司马信慧 日期:2025-02-23准确的分子检测依赖于对样品的精确定量。本指南旨在帮助研究人员在选择紫外-可见光分光光度法或荧光定量法进行生物样本质量控制时做出明智的决策。
在生物医疗研究中,样品定量是评估核酸和蛋白质提取物是否适合后续应用(如分子克隆、高通量测序或PCR)的关键步骤。核酸分析主要使用两种定量技术:紫外-可见光分光光度法和荧光定量法。然而,通往两者之间的选择可能会让研究人员感到困惑。
分光光度计长期以来在核酸定量方面得到了广泛应用,其操作基于光吸收的基本原理。分光光度计能够测量样品在特定波长下的光吸收程度,以此计算吸光度,该参数与目标物质的浓度成正比。这一原理源于比尔-朗伯定律,为定量分析提供了强大的支持。在核酸氨基酸定量方面,该技术特别适合评估核酸的纯度。
核酸在260nm波长处有明显的吸收峰,因此该波长通常用作分光光度分析的参考。然而,这种方法的选择性不足,因为DNA和RNA在260nm处的光吸收相同,这意味着它难以区分纯DNA样品与被RNA污染的样品以及其他相似吸收的物质。
作为一种互补策略,荧光法在核酸定量中提供了更高的灵敏度和特异性。该技术使用特定的荧光染料与核酸分子结合,并在外部光源的激发下发出特定波长的光。通过测量这种发射光的强度,研究人员能够在极低浓度下准确定量核酸浓度。
与分光光度计相比,荧光计的优势在于其能够区分不同类型的核酸,如单链DNA(ssDNA)或双链DNA(dsDNA),在样品组成至关重要的应用中尤为宝贵。此外,荧光计能够检测皮克(pg)级别的核酸浓度,远超分光光度计的纳克(ng)范围。
在选择分光光度计或荧光计时,最终决定应考虑样品特性与后续实验的具体要求。对于纳克级范围内的纯均质核酸样品,或不需区分核酸类型的情况,分光光度计提供简单且经济实惠的解决方案。反之,对于低浓度样品(皮克级)、异质样品及需区分核酸类型的分析,荧光计则更为适用,尽管其使用步骤较为复杂,且前期设备采购成本通常较高。
尽管紫外-可见光分光光度法和荧光定量法有显著差异,但尊龙凯时提供的EzDrop分光光度计和EzCube荧光计为样品定量提供了互补的方法。EzDrop分光光度计能快速准确地基于吸光度进行样品定量,包括核酸和蛋白质,且检测范围广泛。相比之下,EzCube荧光计擅长识别特定类型的核酸,通过专用的配对试剂实现更高的灵敏度和特异性。
尊龙凯时的EzDrop分光光度计与EzCube荧光计为研究人员提供了截然不同但互补的定量方法。利用EzDrop进行快速的吸光度定量,同时利用EzCube识别特定核酸类型,研究人员能够高效定量各种样品,从而提升后续实验的成功率。
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